以黃金勾為代表的菜豆品種是東北黑土區重要的雜糧與蔬菜,深受東北地區民眾所喜愛。目前,菜豆基因克隆和功能解析尚處于起步階段,為快速克隆菜豆基因,我們在前期制備了一個菜豆黃金勾品種大龍1號的突變體庫。在該突變體庫中,篩選得到一個雄性不育突變體ms-2(male sterility 2.圖A)。為了利用雜種優勢來提高作物產量,雄性不育特性在很多作物中研究較為深入。在菜豆中,雖已觀察到雄性不育現象,但是還沒有克隆相關的基因,特別是還沒有對其相關的機理進行深入研究。
東北地理所研究團隊利用SNP測序和自主設計的菜豆InDel分子標記,通過圖位克隆的方法精細定位了菜豆雄性育性基因MS-2為Phvul.003G031200基因(圖B);在ms-2突變體中Phvul.003G031200基因剪切位點發生變異,使得蛋白質序列缺少3個氨基酸(圖C-D);利用石蠟切片對小孢子體發育過程進行觀察,發現MS-2基因的剪切位點變異導致絨氈層降解提前是ms-2突變體雄性不育的原因(圖E)。ms-2突變體可結實大量的無籽肉莢,外源噴施2 mM生長素物質吲哚乙酸(IAA)能使ms-2突變體上的肉質無籽莢的莢長、莢寬、莢厚和單莢鮮重顯著增加(圖F-H),體積增大的無籽肉莢具有加工或直接食用的潛能。本研究定位與克隆了菜豆雄性育性基因MS-2.明確了該基因突變導致菜豆不育的機理。MS-2基因可應用于培育肉質無籽莢菜豆品種,具有很好的應用價值,同時為雜種優勢的利用奠定了堅實的理論基礎。
研究成果近期發表在中科院一區期刊《Theoretical and Applied Genetics》上,東北地理與農業生態研究所徐坤助理研究員為論文第一作者,夏正俊研究員為論文通訊作者。該研究得到中國科學院戰略性先導科技專項(XDA28070000)、國家自然科學基金(32001506、U21A20215、31771869)和中國科學院東北地理與農業生態研究所青年科學家小組項目(2022QNXZ05)聯合資助。
圖. MS-2基因克隆和功能分析
論文信息:Kun Xu, Jinlong Zhu, Ning Guo, Jinyu Liu, Hong Zhai, Xiaobin Zhu, Yi Gao, Hongyan Wu, Zhengjun Xia. A novel 7-base pair deletion at a splice site in MS-2 impairs male fertility via premature tapetum degradation in common bean (Phaseolis vulgaris L.). Theor Appl Genet 2023. 136. 56.
論文鏈接:https://doi.org/10.1007/s00122-023-04255-8